Mayes R W, Mason R M, Griffin D C
Biochem J. 1973 Mar;131(3):541-53. doi: 10.1042/bj1310541.
按照哈斯卡尔和萨伊德拉(1969年)所述的基本方法,通过平衡密度梯度离心法,从牛鼻软骨提取物中制备蛋白聚糖组分(蛋白聚糖亚基组分),该提取物含有0.15m - KCl(低离子强度)以及0.5m - LaCl₃、2.0m - CaCl₂和4.0m - 氯化胍(高离子强度)。
不同离心时间的使用表明,对于从高离子强度提取物制备的组分,48小时可达到接近平衡的条件。从低离子强度提取物中分离的组分需要更长的离心时间才能达到平衡条件。
通过分析各种提取物中蛋白聚糖组分的碳水化合物和氨基酸含量,对其组成进行比较。根据氨基酸分析计算差异指数,以比较蛋白聚糖蛋白质组分之间的组成关系程度。
在从各种高离子强度提取物中分离出的蛋白聚糖之间发现了微小的组成差异。在这方面,CaCl₂提取物和氯化胍提取物的组分蛋白质含量差异最大,尽管它们的氨基酸分析相似。
从低离子强度提取物中分离出的蛋白聚糖组分与从高离子强度提取物中分离出的组分在组成上有明显差异。其蛋白质和氨基葡萄糖含量较低,而己糖醛酸和半乳糖胺含量高于后者。其氨基酸组成也存在主要差异。低离子强度提取物组分的氨基葡萄糖:半乳糖胺比率表明它可能几乎完全是硫酸软骨素蛋白聚糖。其分析与齐加诺斯和缪尔(1969年)从猪喉软骨中分离出的低分子量蛋白聚糖的分析密切相关。
在pH3.0和pH7.0的蔗糖密度梯度区带电泳中,低离子强度和高离子强度提取物中的蛋白聚糖组分均以单一谱带迁移,尽管在电泳过程中每条谱带都有展宽的迹象。在pH3.0时,所有蛋白聚糖组分均以相同的电泳迁移率迁移,无论它们之间的组成差异如何。
讨论了低离子强度和高离子强度提取物中蛋白聚糖之间的差异,并提出观点认为它们可能是由于主要的硫酸软骨素蛋白聚糖与富含硫酸角质素的蛋白聚糖种类之间的缔合所致。