Gillespie J S, Hamilton D N, Hosie J A
J Physiol. 1970 Mar;206(3):563-90. doi: 10.1113/jphysiol.1970.sp009031.
首先通过用去甲肾上腺素(NA)灌注猫脾脏10分钟,接着进行2分钟冲洗以清除细胞外液,然后测量保留的量、其亚细胞分布以及通过特征性荧光的显现所揭示的参与其中的组织成分,来研究猫脾脏中去甲肾上腺素(NA)的神经元外摄取。其次,将脾脏薄片在体外暴露于NA,并测量各种结构,特别是动脉平滑肌中荧光的显现情况。
猫脾脏积累了大量的NA,并且这与荧光的显现一样,呈浓度依赖性。在颗粒分离后,大部分保留的胺出现在高速上清液中,粗颗粒部分中的量较少。线粒体或微粒体部分中几乎没有胺。未灌注脾脏的微粒体部分富含NA,推测来自肾上腺素能神经的储存颗粒。在间歇蔗糖密度梯度上,富含NA的颗粒沉淀在1.0至1.5M蔗糖之间,对应于最近描述的来自牛脾神经的致密颗粒。
荧光组织化学显示有几种组织积累NA。在NA浓度为10⁻⁵g/ml时,动脉平滑肌和内皮显示细胞内荧光;在10⁻⁴g/ml时,胶原、被膜 - 小梁 - 静脉系统平滑肌细胞的周边以及形成脾脏框架的网状细胞出现荧光。在网状细胞中,荧光是细胞内的。非动脉平滑肌周边的荧光模式与PAS染色所示的基底膜模式相对应。红髓、淋巴组织和椭球体的吞噬细胞不发荧光。
将组织冷却至15℃或更低温度、浓度为5×10⁻⁵g/ml的苯氧苄胺或浓度为10⁻⁴g/ml的去甲变肾上腺素可阻止动脉平滑肌中NA的摄取和丢失,但对胶原无影响。
慢性节后去神经支配或利血平对任何神经元外组织中荧光的显现均无影响。