Suppr超能文献

利用 CRISPR-Cas9 技术在粗糙脉孢菌中进行无标记基因组编辑。

Marker-free genome editing in Ustilago trichophora with the CRISPR-Cas9 technology.

机构信息

a B.R.A.I.N AG , Zwingenberg , Germany.

出版信息

RNA Biol. 2019 Apr;16(4):397-403. doi: 10.1080/15476286.2018.1493329. Epub 2018 Aug 10.

Abstract

In this communication, we report the adaptation of the CRISPR-Cas9 technology in Ustilago trichophora prototrophic wild-type isolate obtained from its natural host Echinochloa crus-galli. The established CRISPR vector and method enable a rapid and marker-free introduction of Cas9-induced non-homologous end-joining (NHEJ) dependent mutation at the targeted gene. Moreover, the method allows a specific modification of the chromosomal DNA sequence by Cas9-induced homologous recombination using short DNA repair templates. The results demonstrate the applicability of the CRISPR-Cas9 technology in U. trichophora for both gene knock-out by the NHEJ pathway and specific gene modification by templated genome editing, paving the way for rapid metabolic engineering of this Ustilago species for industrial applications.

摘要

在本通讯中,我们报告了在从其自然宿主节节麦中获得的产朊假丝酵母野生型原生质体中,CRISPR-Cas9 技术的适应性。所建立的 CRISPR 载体和方法可在靶基因上快速且无标记地引入 Cas9 诱导的非同源末端连接(NHEJ)依赖性突变。此外,该方法允许使用短的 DNA 修复模板通过 Cas9 诱导的同源重组来特异性修饰染色体 DNA 序列。结果表明,CRISPR-Cas9 技术可用于产朊假丝酵母中的基因敲除和基于模板的基因组编辑的特定基因修饰,为该产朊假丝酵母物种的快速代谢工程铺平了道路,可用于工业应用。

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