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采用 GPC-LS 对蓝鲨()胶原蛋白水解物进行分子量分析;高分子量水解物对成纤维细胞培养的影响:I 型胶原 mRNA 表达和合成。

Molecular Weight Analysis of Blue Shark () Collagen Hydrolysates by GPC-LS; Effect of High Molecular Weight Hydrolysates on Fibroblast Cultures: mRNA Collagen Type I Expression and Synthesis.

机构信息

Food Biochemistry Group, Instituto de Investigaciones Marinas, Consejo Superior de Investigaciones Científicas, C/Eduardo Cabello, 6, CP 36208 Vigo, Spain.

出版信息

Int J Mol Sci. 2021 Dec 21;23(1):32. doi: 10.3390/ijms23010032.

Abstract

High molecular weight (Mw) collagen hydrolysates have been demonstrated to produce a higher synthesis of collagen type I mRNA. Mw determination is a key factor maximizing the effect of collagen hydrolysates on collagen type I synthesis by fibroblasts. This work aimed to achieve a high average Mw in Blue Shark Collagen Hydrolysate, studying different hydrolysis parameters by GPC-LS analysis and testing its effect on mRNA Type I collagen expression. Analysis revealed differences in blue shark collagen hydrolysates Mw depending on hydrolysis conditions. Papain leads to obtaining a significantly higher Mw hydrolysate than Alcalase at different times of hydrolysis and at different enzyme/substrate ratios. Besides, the time of the hydrolysis factor is more determinant than the enzyme/substrate ratio factor for obtaining a higher or lower hydrolysate Mw when using Papain as the enzyme. Contrary, Alcalase hydrolysates resulted in similar Mw with no significant differences between different conditions of hydrolysis assayed. Blue shark collagen hydrolysate showing the highest Mw showed neither cytotoxic nor proliferation effect on fibroblast cell culture. Besides, it exhibited an increasing effect on both mRNA expression and pro-collagen I production.

摘要

高分子量 (Mw) 的胶原蛋白水解产物已被证明能产生更高水平的 I 型胶原 mRNA 合成。Mw 的测定是通过成纤维细胞最大限度地提高胶原蛋白水解产物对 I 型胶原合成影响的关键因素。本研究旨在通过凝胶渗透色谱-激光散射 (GPC-LS) 分析研究不同的水解参数,实现蓝鲨胶原蛋白水解产物的高平均 Mw,并测试其对 I 型胶原 mRNA 表达的影响。分析表明,不同的水解条件会导致蓝鲨胶原蛋白水解产物 Mw 的差异。与 Alcalase 相比,木瓜蛋白酶在不同的水解时间和不同的酶/底物比下得到的水解产物 Mw 显著更高。此外,当使用木瓜蛋白酶作为酶时,水解时间因素比酶/底物比因素更能决定获得更高或更低的水解产物 Mw。相反,用 Alcalase 水解得到的产物 Mw 相似,在所测试的不同水解条件下没有显著差异。显示出最高 Mw 的蓝鲨胶原蛋白水解产物对成纤维细胞培养既没有细胞毒性也没有增殖作用。此外,它对 mRNA 表达和前胶原 I 产生都有增加作用。

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