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用于改进艰难梭菌CRISPR-Cas9诱变系统的质粒序列及可用性

Plasmid Sequence and Availability for an Improved Clostridioides difficile CRISPR-Cas9 Mutagenesis System.

作者信息

Brehm Joshua N, Sorg Joseph A

机构信息

Department of Biology, Texas A&M University, College Station, Texas, USA.

出版信息

Microbiol Resour Announc. 2022 Dec 15;11(12):e0083322. doi: 10.1128/mra.00833-22. Epub 2022 Nov 7.

DOI:10.1128/mra.00833-22
PMID:36342279
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9753633/
Abstract

A two-plasmid mutagenesis system for Clostridioides difficile is described that improves ease of use and efficiency in creating site-directed mutations. pJB06 contains a xylose-inducible gene, while the second plasmid (pJB07) encodes the corresponding guide RNA (gRNA) and regions of homology for repair of the introduced double-stranded DNA (dsDNA) breaks, both of which are replaceable via restriction digest.

摘要

本文描述了一种用于艰难梭菌的双质粒诱变系统，该系统提高了创建定点突变的易用性和效率。pJB06包含一个木糖诱导型基因，而第二个质粒（pJB07）编码相应的引导RNA（gRNA）和用于修复引入的双链DNA（dsDNA）断裂的同源区域，这两者均可通过限制性酶切进行替换。

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