Department of Biology, Saint Mary's University, Halifax, Canada.
Methods Mol Biol. 2025;2850:467-479. doi: 10.1007/978-1-0716-4220-7_26.
The Golden Gate cloning technique is used to assemble DNA parts into higher-order assemblies. Individual parts containing compatible overhangs generated by type IIS restriction enzymes are joined together using DNA ligase. The technique enables users to assemble custom transcription units (TUs) for a wide array of experimental assays. Several Golden Gate cloning systems have been developed; however, they are typically used with a narrow range of organisms. Here we describe the Multi-Kingdom (MK) cloning system that allows users to generate DNA plasmids for use in a broad range of organisms.
金 门 克 隆 技 术 用 于 将 DNA 部 分 组 装 成 高 阶 组 装 体。通 过 类 IIIS 限 制 酶 生 成 的 个 体 部 分 含 有 兼 容 的 突 出 端,使 用 DNA 连 接 酶 将 它 们 连 接 起 来。该 技 术 使 用 户 能 够 组 装 用 于 广 泛 的 实 验 检 测 的 自 定 义 转 录 单 元(TU)。已 开 发 出 几 种 金 门 克 隆 系 统;然 而,它 们 通 常 仅 在 狭 窄 的 生 物 范 围 内 使 用。在 这 里,我 们 描 述 了 多 界(MK)克 隆 系 统,它 使 用 户 能 够 生 成 广 泛 用 于 各 种 生 物 的 DNA 质 粒。