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一种可将模板降解降至最低的5-甲基胞嘧啶图谱亚硫酸氢盐法。

A bisulfite method of 5-methylcytosine mapping that minimizes template degradation.

作者信息

Raizis A M, Schmitt F, Jost J P

机构信息

Friedrich Miescher Institut, Basel, Switzerland.

出版信息

Anal Biochem. 1995 Mar 20;226(1):161-6. doi: 10.1006/abio.1995.1204.

DOI:10.1006/abio.1995.1204
PMID:7785768
Abstract

The bisulfite method is a highly sensitive approach to 5-methylcytosine mapping that utilizes the capability of the polymerase chain reaction to exponentially amplify DNA. We have observed that the bisulfite reaction results in a significant level of template degradation due to DNA depurination. Furthermore, our data suggest that the DNA fragmentation which occurs limits the sensitivity of the method. We describe a simple solution to limit degradation of the DNA template.

摘要

亚硫酸氢盐法是一种用于5-甲基胞嘧啶图谱绘制的高灵敏度方法,它利用聚合酶链反应对DNA进行指数级扩增的能力。我们观察到,由于DNA脱嘌呤作用,亚硫酸氢盐反应会导致显著水平的模板降解。此外,我们的数据表明,发生的DNA片段化限制了该方法的灵敏度。我们描述了一种限制DNA模板降解的简单解决方案。

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