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通过绕过胚状体聚集从多能干细胞的二维培养物中生成人类大脑类器官的方案。

Protocol for generating human cerebral organoids from two-dimensional cultures of pluripotent stem cells bypassing embryoid body aggregation.

作者信息

González-Sastre Rosa, Coronel Raquel, Mateos-Martínez Patricia, Maeso Laura, Llorente-Beneyto Elena, Luque Alfonso, Anta Berta, López-Alonso Victoria, Liste Isabel

机构信息

Unidad de Regeneración Neural, Unidad Funcional de Investigación de Enfermedades Crónicas (UFIEC), Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), Majadahonda, Madrid 28220, Spain; Unidad de Biología Computacional, Unidad Funcional de Investigación de Enfermedades Crónicas (UFIEC), Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), Majadahonda, Madrid 28220, Spain; Doctoranda en la Escuela Internacional de Doctorado de la Universidad Nacional de Educación a Distancia (UNED), Programa en Ciencias Biomédicas y Salud Pública.

Unidad de Regeneración Neural, Unidad Funcional de Investigación de Enfermedades Crónicas (UFIEC), Instituto de Salud Carlos III (ISCIII), Majadahonda, Madrid 28220, Spain.

出版信息

STAR Protoc. 2025 Mar 21;6(1):103678. doi: 10.1016/j.xpro.2025.103678. Epub 2025 Mar 11.

DOI:10.1016/j.xpro.2025.103678
PMID:40073022
原文链接:https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11950768/
Abstract

Human cerebral organoids (hCOs) provide an excellent model for the study of human brain development and disease. Here, we present a protocol to obtain hCOs directly from two-dimensional (2D) pluripotent stem cell (PSC) cultures, avoiding cell dissociation and posterior embryoid body (EB) aggregation. We describe steps for subjecting 2D cultures to a neural fate and subsequently developing hCOs. We then detail the evaluation of different cellular types. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to González-Sastre et al..

摘要

人源大脑类器官（hCOs）为研究人类大脑发育和疾病提供了一个极佳的模型。在此，我们展示了一种直接从二维（2D）多能干细胞（PSC）培养物中获取hCOs的方案，避免了细胞解离和后续胚状体（EB）聚集。我们描述了使2D培养物定向分化为神经命运并随后发育成hCOs的步骤。然后，我们详细介绍了对不同细胞类型的评估。有关此方案的使用和执行的完整详细信息，请参考冈萨雷斯 - 萨斯特雷等人的研究。

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